Análisis de plantas transgénicas ATEMYB32::IPT de pasto miel (Paspalum dilatatum Poir.) una gramínea C4

En plantas forrajeras como Paspalum dilatatum Poir, la senescencia foliar es un procesoque afecta su producción y especialmente su calidad. Una estrategia molecular pararetrasar la senescencia mediante la ingeniería genética se basa en la expresión de lasecuencia codificante de la isopentenil transferasa (IPT), enzima clave en la biosíntesisde citoquininas. Para lograrlo se utilizan promotores con expresión no constitutiva quepermitan la producción autorregulada de citoquininas. Se analizó el efecto de laincorporación vía transgénesis de las construcción quimérica ATEMYB32::IPT enclones de Paspalum dilatatum cv “Relincho”. Se estudiaron 8 eventos obtenidosmediante transformación biolística con controles isogénicos, dos provenientes decultivo de tejido que no incorporaron al transgén después de la transformación biolísticay uno de campo. Los individuos fueron propagados vegetativamente para generarréplicas que permitieron estimar la respuesta de los eventos a diferentes condiciones deestrés abiótico (deficiencias hídricas y temperaturas bajas extremas). Se realizaronanálisis moleculares, PCR para amplificar el transgén ipt, complementándose estainformación con la medición del nivel de citocininas y auxinas por HPLC. Secaracterizaron a las líneas transgénicas desde su comportamiento germinativo, suanatomía foliar y la ultraestructura de los cloroplastos. En todas las plantas ensayadas seestimó el contenido de clorofila, azúcares, proteínas totales y actividad de la enzima SOD. Se halló un mayor nivel de citocininas y de la relación citocininas/auxinas enplantas transgénicas respecto a las controles y variabilidad entre los eventos analizados. A niveles anatómico y ultraestructural se encontraron características distintivas de laslíneas transgénicas. Además algunos de los eventos obtenidos mostraron una mayorresistencia a ambas condiciones de estrés y un mejor comportamiento germinativo. Segeneraron conocimientos para comprender el efecto de la incorporación del transgén ATEMYB32::IPT en especies C4.

Detalles Bibliográficos

Autor principal:	Viñas, Ezequiel Santiago
Otros Autores:	Schrauf, Gustavo Enrique
Formato:	info:eu-repo/semantics/doctoralThesis biblioteca
Idioma:	spa
Publicado:	Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales
Materias:	IPT, PASPALUM, CITOCININAS, TRANSGEN, ATEMYB32, CYTOKININS, TRANSGENE,
Acceso en línea:	https://hdl.handle.net/20.500.12110/tesis_n5742_Vinas http://repositoriouba.sisbi.uba.ar/gsdl/cgi-bin/library.cgi?a=d&c=aextesis&d=tesis_n5742_Vinas_oai
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