Estudio da interaçao molecular entre Hevea brasiliensis e Microcyclus ulei : Relatorio final CNPq n°19/2004 - Universal
Contexto e objetivos O Mal-das-folhas (South American leaf bligh) é causado por um ascomycota, Microcyclus ulei (P. Henn.) c. Arx., e é para a seringueira a praga mais importante na America latina e a maior ameaça para as plantações da Asia e da Africa que produzem 95% da borracha mundial com cultivares suceptíveis. Até hoje poucas informações eram disponíveis para entender os processos biologicos do desenvolvimento da doença. Por isso, bibliotecas de ESTs usando a técnica SSH (suppression subtractive hybridization) foram criadas para identificar genes diferencialmente expressos em diferentes etapas da interação patogénica com Microcyclus ulei. - Methodologia Para identificarse genes candidatos e ganhar uma melhor comprehenção da interação hospedeiro-parasito no patosistema Hevea brasiliensis - Microcyclus ulei, bibliotecas SSH foram comparadas. Foliolos do cultivar parcialmente resistente, MDF180, e do cultivar suceptível PB314 foram inoculados. Utilizando as folhas infectadas entre 6 e 72 horas p.i. e entre 4 e 28 dias p.i. (vs. folhas sadias coletadas nas mesmas condições), duas bibliotecas para cada cultivar enriquecidas em genes altamente expressos foram preparadas. - Resultados A partir de 6667 clones ESTs aleatoriamente catados entre todas as bibliotecas e sequenciados, foram obtidos 1379 singletons e 440 contigs seja um total de 1819 sequências não redundantes. A redundancia de cada bibliotecas foi variavél entre 87% em PB314 4-28 d.p.i. até 23% em MDF180 4-28 d.p.i. Das sequências geradas, 49% foram anotadas com uma função provavél, 21% corresponderam a função desconhacidas e 30% não mostraram similaridades com outras sequências presentes em GenBank NR, pfam e GEO. As sequências de cada bibliotecas monstraram-se altamente específica do cultivar e do tempo após infeção. Uma comparação com as sequencias de Hevea disponíveis em Genbank monstra que em media para cada biblioteca, mais de 77% das sequências são originais. A comparação das seqüencias isoladas e anotadas em cada cultivar permite emitir hipothesis sobre os mecanismos levando a resistência or susceptibilidade dos cultivares. Vias de sinalização e genes candidatos envolvidos na resistência são propostos e deveram ser confirmados por estudos complementares. Foram identificados varios fragmentos microsatelites que são de grande importancia para desenvolver novos marcadores moleculares e podem possibilitar o posicionamento de alguns deles no mapa genético da seringueira e eventualmente colocalizar com QTLs envolvidos na resistência ao Mal-das-folhas. Os primeiros genes expressos isolados do micélio do Microcyclus ulei e sequenciados permitiram detectar que os ESTs desse fungo estavam mais ricos em GC em comparação as ESTs da hévea possibilitando a detecção da origem dos ESTs nas bibliotecas SSH de interação. - Conclusão Esse trabalho representa as primeiros recursos moleculares (ESTs) obtidos a partir de folhas de seringueira e mais especificamente a partir de uma interação entre Hevea e M. ulei. Esses novos recursos são importante para entender melhor os mecanismo molecular da resistência da seringueira ao M. ulei tanto como para desenvolver macadores a partir de genes candidatos para uma seleção assistida por marcadores moleculares. Com a aprovação pela Agence Nationale de la Recherche do projeto GENESALB (cord. CIRAD, parceria CIRAD, Michelin, UESC), enfoque será dado a validação de genes candidatos identificado nesse e envolvido na resistência durável.
Main Authors: | , , , , , , , , , , , , |
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Format: | monograph biblioteca |
Language: | por |
Published: |
CNPQ
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Subjects: | H20 - Maladies des plantes, F30 - Génétique et amélioration des plantes, Hevea brasiliensis, Microcyclus ulei, http://aims.fao.org/aos/agrovoc/c_3589, http://aims.fao.org/aos/agrovoc/c_24769, http://aims.fao.org/aos/agrovoc/c_1070, |
Online Access: | http://agritrop.cirad.fr/551123/ http://agritrop.cirad.fr/551123/1/document_551123.pdf |
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