Propagação clonal in vitro de abacaxizeiro em sistema dupla-face e conservação de germoplasma sob regime de crescimento mínimo.
A cultura do abacaxizeiro ocupa lugar de destaque em regiões de clima tropical, sendo o Brasil o segundo maior produtor mundial. O uso de mudas produzidas convencionalmente pode acarretar problemas para os plantios comerciais, devido à baixa qualidade das mesmas. Por isso, é de fundamental interesse que plantas de a lta qualidade genética e fitossanitária sejam produzidas. A micropropagação é uma alternativa para a produção de mudas de abacaxizeiros de qualidade, em larga escala, curto período de tempo e espaço físico reduzido. O objetivo deste trabalho foi produzir um protocolo para a propagação clonal in vitro em larga escala de variedades de abacaxizeiros em Sistema Dupla-Fase, além de desenvolver metodologia para a conservação in vitro de germoplasma de abacaxizeiros sob regime de crescimento mínimo. O trabalho foi conduzido no LABMOL e anexos da Embrapa Acre. Como fonte de explantes para os experimentos foram utilizadas gemas axilares de brotações do tipo filhote das variedades Rio Branco (RB), Senador Guiomard (SG) e Quinarí (QN), estabelecidos in vitro. Num primeiro experimento, brotações foram colocadas para se desenvolver em 40 mL de meio de cultura em dois sistemas de cultivo: Convencional (meio semi-sólido) e Dupla-Fase. No Sistema Dupla-Fase, a cada subcultivo de 30 dias foi adicionado 30 mL de meio líquido sobre o meio semi-sólido inicial, enquanto que no tratamento convencional (semi-sólido) as avaliações e as brotações formadas foram transferidas para novos meios de consistência semi-sólida a cada subcultivo. Foi avaliada a taxa de multiplicação, altura de brotações maiores e menores que 0,5 cm, além da estimativa do número de mudas a serem produzidas em razão do tempo de multiplicação. Ao final do processo de multiplicação, as brotações foram enraizadas em diferentes composições do meio de MS (Pleno e ½) e concentrações de AIB (0; 0,1; 0,5 mg.L-1), sendo em seguida aclimatizadas em viveiro. Brotações de abacaxizeiro também foram avaliadas quanto à conservação in vitro por seis meses em meio de cultura de MS e sob três temperaturas: 15 oC, 20 oC e 25 oC. De maneira geral, observou-se que o sistema Dupla-fase foi superior ao semi-sólido em relação a todas as variáveis avaliadas. A produção total de brotações a partir de oito explantes iniciais e após 150 dias de cultivo no Sistema Dupla-Fase, para as variedades RB, SG e QN foi de 488,2; 419,3; e 341,8, respectivamente. Estes valores foram significativamente superiores aos observados quando o cultivo ocorreu em sistema convencional (meio semi-sólido), que foi de 299,8; 289,7 e 206,8 respectivamente. A partir dos resultados obtidos em Sistema Dupla-Fase, estimouse a taxa potencial de multiplicação de até 7.465 novas brotações por explante para a variedade RB, 5.329 para a SG e 5.055 para a QN ao final de um segundo subcultivo de 150 dias. Independentemente das concentrações de AIB e dos sais do meio de MS testadas, de maneira geral não foram observadas diferenças nas taxas de enraizamento in vitro das brotações, que alcançaram valores próximos a 100%. As brotações enraizadas quando aclimatizadas em viveiro apresentaram 100% de sobrevivência, Quando se avaliou a conservação das brotações verificou-se que a temperatura de 15 oC foi a que proporcionou os menores índices de crescimento, podendo ser indicada para a conservação ou manutenção de germoplasma de abacaxizeiro in vitro. Pineapple is a prominent crop in tropical areas, including Brazil, the second country in production. Propagative plant material produced conventionally can cause problems for commercial pineapple plantations, due to the low phytosanitary quality of the plantlets. Thus, it is of fundamental interest to produce plantlets with high genetic and phytosanitary quality to producers. Micropropagation is an alternative for plantlets production with quality, in wide scale, short period of time and reduced physical space. The objective of this work was to produce a protocol for in vitro clonal propagation of pineapple plantlets in Double-Phase Culture System, besides developing a methodology for in vitro conservation of pineapple genotypes under minimum growth. The work was carried out in the Laboratory of Plant Tissue Culture and Molecular Biology and nursery of Embrapa Acre, Rio Branco, AC. As source of explants, it was used axillary buds established in vitro from Rio Branco (RB), Senador Guiomard (SG) and Quinarí (QN) genotypes. In a first experiment, microshoots were placed into 40 mL culture medium and two conditions of in vitro multiplication: Conventional (semi-solid medium) and Double-Phase Culture System. On Double-Phase System, in each subculture of 30 days 30 mL of liquid culture was added on the semi-solid medium, while in the conventional treatment (semi-solid medium) the evaluations and the regenerated shoots were transferred into new medium of semi-solid consistency. It was evaluated the multiplication rate, shoot height (larger and smaller than 0.5 cm), besides to estimate the number of plantlets to be produced during the time of multiplication. At the end of the multiplication process, the microshoots were rooted in different compositions of MS salts (Full and ½), and concentrations of IBA (0; 0.1; 0.5 mg.L-1). Rooting shoots were acclimatized in nursery. Pineapple microshoots were evaluated for in vitro conservation during six months in MS medium under three temperatures: 15 oC, 20 oC and 25 oC. It was observed that Double-Phase System was superior to Semi-Solid medium. The total microshoots production from eight initial explants and after 150 days in Double-Phase System for RB, SG and QN varieties reached 488.2; 419.3 and 341.8 microshoots, respectively. These means were significantly higher than those observed when the multiplication happened in the conventional system (semi-solid medium), that it was 299.8; 289.7 and 206.8 microshoots, respectively. From these results obtained, it was estimated the potential rate of microshoots multiplication: 7,465 for RB variety, 5,329 for SG variety and 5,055 for QN variety, at the end of more 150 days of cultivation. Independently of the IBA and MS salts concentrations, in general, it was not observed differences on in vitro microshoots rooting which reached almost 100%. When acclimatized in nursery the microshoots rooting presented 100% survival. During the in vitro conservation, it was verified that the temperature of 15 oC provided the smallest shoot growth, should be indicated for conservation or maintenance of in vitro pineapple germplasm.
| Main Author: | |
|---|---|
| Other Authors: | |
| Format: | Teses biblioteca |
| Language: | pt_BR pt_BR |
| Published: |
2010-02-12
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| Subjects: | Cultura in vitro, Abacaxi, Micropropagação, Ananás Comosus, |
| Online Access: | http://www.alice.cnptia.embrapa.br/alice/handle/doc/657929 |
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