Avaliação "in vitro" do efeito de inibidores de proteases contra larvas de primeiro estágio de Cochliomyia hominivorax: estudos preliminares.
Os produtos de excreção/secreção (PE/S) das larvas de primeiro estágio de Cochliomyia hominivorax (L1) foram preparados usando-se ovos originados de uma colônia mantida em laboratório. O perfil das proteínas dos PE/S foi obtido usando a eletroforese em gel de poliacrilamida contendo dodecil sulfato de sódio (SDS-PAGE) e a atividade proteolítica foi investigada nos mesmos géis, utilizando gelatina como substrato. A caracterização das proteases foi investigada também em géis com gelatina como substrato, tratando-se as amostras dos PE/S com os seguintes inibidores sintéticos de proteases: phenilmetilsulfonil fluoride = PMSF, tosilfenilalanil clorometil cetona = TPCK, tosil lisil clorometil cetona = TLCK, ácido etileno diamino tetracético = EDTA e 3,4- dicloroisocumarina = DCI. O perfil das proteínas produzidas por L1 revelou a presença de diversas bandas protéicas com massas moleculares entre 97 KDa e 14 KDa. Foi verificada ampla atividade proteolítica dos PE/S de L1 sobre a gelatina, desde a região correspondente às proteases de maiores massas moleculares como as intermediárias e baixas. Nos ensaios com inibidores de proteases, foi verificado um predomínio de enzimas do grupo das serina-proteases e metalo-proteases. O primeiro ensaio conduzido "in vitro" para verificação do efeito dos inibidores de proteases sobre o desenvolvimento larvar, foi feito utilizando solução de EDTA. Esse inibidor, na concentração utilizada, foi letal para 40% das larvas após duas horas de exposição e 100% das larvas após 12 horas de exposição. Novos estudos serão conduzidos no laboratório a fim de determinar as melhores concentrações para o EDTA e também para os demais inibidores de proteases identificados.
| Main Authors: | , |
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| Other Authors: | |
| Format: | Artigo de periódico biblioteca |
| Language: | Portugues pt_BR |
| Published: |
2009-02-17
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| Subjects: | Enzimas, Produtos de excreção, Miíases, Secreção, |
| Online Access: | http://www.alice.cnptia.embrapa.br/alice/handle/doc/48764 |
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