Reverse transcription-polymerase chain reaction assay for rabies virus detection
Este estudo teve por objetivo implantar um protocolo de amplificação genômica, precedida de transcrição reversa (RT-PCR) para o gene da nucleoproteína do vírus da raiva, para a utilização dessa metodologia em laboratórios onde são realizadas investigações para a detecção do vírus rábico. Foram utilizadas 50 amostras de tecido encefálico de animais (44 bovinos, 5 eqüinos e 1 quiróptero) oriundos do Estado do Rio de Janeiro, positivos por imunofluorescência direta e/ou prova biológica para o vírus rábico. A extração do RNA foi feita a partir da suspensão a 10% em PBS pH7,2 do tecido encefálico utilizando-se a metodologia de TRIzolTM (Life Technologies) e o protocolo de RT-PCR descrito por Heaton et al. (1997), incluindo algumas modificações. Dentre as 50 amostras analisadas, 50 foram positivas pela prova biológica e pela RT-PCR e destas, 49 foram positivas pela imunofluorescência direta. Estes resultados demonstram ser este protocolo de RT-PCR uma metodologia sensível, específica, rápida e extremamente valiosa, podendo ser utilizada como rotina em laboratórios que trabalham no diagnóstico de vírus rábico.
Main Authors: | Dantas Junior,J.V., Kimura,L.M.S., Ferreira,M.S.R., Fialho,A.M., Almeida,M.M.S., Grégio,C.R.V., Romijn,P.C., Leite,J.P.G. |
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Format: | Digital revista |
Language: | English |
Published: |
Universidade Federal de Minas Gerais, Escola de Veterinária
2004
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Online Access: | http://old.scielo.br/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0102-09352004000300017 |
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