Produção e avaliação de anticorpos policlonais para babesiose bovina com base em peptídeos sintéticos da proteína LDH de Babesia bovis

O parasita Babesia bovis é um dos agentes causadores da babesiose bovina, uma doença tropical associada a altas taxas de mortalidade. Esta doença é transmitida por caraças da espécie Riphicephalus (Boophilus) microplus. A babesiose é responsável por elevados prejuízos económicos, especialmente a redução na produção de carne e leite, além de custos com medidas preventivas e tratamento dos animais. Para o diagnóstico da babesiose são usadas várias técnicas: o diagnóstico parasitológico baseado na observação microscópica, os métodos com base em ADN, os testes serológicos e os testes rápidos de diagnóstico (RDT's) que vem oferecendo um potencial para a ampliação do diagnóstico preciso sendo simples de executar e fáceis de interpretar. O presente trabalho teve como objectivo produzir e avaliar anticorpos policlonais com base em peptídeos sintéticos da proteína LDH de Babesia bovis como poencial para o desenvolvimento de um teste ELISA de captura. A LDH é uma enzima importante para o metabolísmo energético do género babésia onde ela atinge altas concentrações no estágio eritrocítico do parasita. Com ajuda do programa de bioinformática Swiss-Model, a estrutura tridimensional da LDH foi construída; 4 peptídeos sintéticos foram desenhados e produzidos e imunizou-se 8 coelhos e 4 galinhas com os peptídeos. Todos os coelhos e galinhas apresentaram curvas cinéticas de produção de anticorpos crescentes quando testados em ELISA indirecto, com variações dependentes do peptídeo administrado. Contudo, de acordo com o teste ANOVA (p<0.05), a taxa de produção de anticorpos foi semelhante para os quatro peptídeos tanto nos coelhos assim como nas galinhas. Quando testados em ELISA de captura, os anticorpos policlonais, foram capazes de capturar LDH em soro de vitelo experimentalmente infectado por B. bovis com 2% de parasitémia. (Texte intégral)

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Bibliographic Details
Main Authors: Parruque, Mariamo J.M., Neves, Luis, Boulangé, Alain
Format: conference_item biblioteca
Language:por
Published: Universidade Eduardo Mondlane
Subjects:L72 - Organismes nuisibles des animaux, L73 - Maladies des animaux,
Online Access:http://agritrop.cirad.fr/584354/
http://agritrop.cirad.fr/584354/2/584354.pdf
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Description
Summary:O parasita Babesia bovis é um dos agentes causadores da babesiose bovina, uma doença tropical associada a altas taxas de mortalidade. Esta doença é transmitida por caraças da espécie Riphicephalus (Boophilus) microplus. A babesiose é responsável por elevados prejuízos económicos, especialmente a redução na produção de carne e leite, além de custos com medidas preventivas e tratamento dos animais. Para o diagnóstico da babesiose são usadas várias técnicas: o diagnóstico parasitológico baseado na observação microscópica, os métodos com base em ADN, os testes serológicos e os testes rápidos de diagnóstico (RDT's) que vem oferecendo um potencial para a ampliação do diagnóstico preciso sendo simples de executar e fáceis de interpretar. O presente trabalho teve como objectivo produzir e avaliar anticorpos policlonais com base em peptídeos sintéticos da proteína LDH de Babesia bovis como poencial para o desenvolvimento de um teste ELISA de captura. A LDH é uma enzima importante para o metabolísmo energético do género babésia onde ela atinge altas concentrações no estágio eritrocítico do parasita. Com ajuda do programa de bioinformática Swiss-Model, a estrutura tridimensional da LDH foi construída; 4 peptídeos sintéticos foram desenhados e produzidos e imunizou-se 8 coelhos e 4 galinhas com os peptídeos. Todos os coelhos e galinhas apresentaram curvas cinéticas de produção de anticorpos crescentes quando testados em ELISA indirecto, com variações dependentes do peptídeo administrado. Contudo, de acordo com o teste ANOVA (p<0.05), a taxa de produção de anticorpos foi semelhante para os quatro peptídeos tanto nos coelhos assim como nas galinhas. Quando testados em ELISA de captura, os anticorpos policlonais, foram capazes de capturar LDH em soro de vitelo experimentalmente infectado por B. bovis com 2% de parasitémia. (Texte intégral)