Produção heteróloga e caracterização funcional de mono­-oxigenases líticas de polissacarídeos de fungos e bactérias.

Mono-oxigenases líticas de polissacarídeos (LPMOs) são enzimas de grande interesse industrial por serem capazes de despolimerizar polissacarídeos recalcitrantes, como a celulose, e apresentarem sinergismo com hidrolases na degradação destes polímeros, tendo potencial para aplicação em diversos processos. Este trabalho teve como objetivo produzir e caracterizar LPMOs recombinantes de origem fúngica e bacteriana e desvendar seu potencial para aplicações biotecnológicas. Três LPMOs dos fungos Neurospora crassa, Gloeophyllum trabeum e Botryobasidium botryosum (subfamília AA9) e cinco LPMOs das bactérias extremófilas Thermobifida fusca, Hahella ganghwensis, Salinispora pacifica, Verrucosispora maris e Moritella dasanensis (subfamília AA10) foram selecionadas e expressas pela levedura metilotrófica Pichia pastoris X­-33 (reclassificada como Komagataella phaffii). As enzimas recombinantes foram caracterizadas combinando ensaio fluorométrico e ensaio de despolimerização de celulose avaliado por cromatografia líquida acoplada a espectrometria de massas. Das oito LPMOs recombinantes obtidas, cinco foram caracterizadas e mostraram -se funcionais por pelo menos um dos métodos utilizados, sendo que três foram capazes de despolimerizar a celulose. A LPMO da bactéria S. pacifica apresentou regioseletividade C1/C4, enquanto as pertencentes a H. ganghwensis e T. fusca apresentaram regioseletividade C1, apresentando potencial para diferentes aplicações biotecnológicas. A capacidade de despolimerizar a celulose faz desse conjunto de LPMOs recombinantes um ativo tecnológico que poderá ser avaliado como insumo para o desenvolvimento de novos produtos/processos que dependem da despolimerização da celulose, p. ex.:, sacarificação de biomassa lignocelulósica para produção de etanol 2G, ração animal, indústria têxtil, entre outras aplicações.

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Main Authors: SILVA, C. de O. G., RODRIGUES, K. B., SOUZA, A. A., MONCLARO, A. V., ANASTÁCIO, G. S., MENDES, T. D., GONCALVES, S. B., SALUM, T. F. C., RODRIGUES, D. de S., DAMASO, M. C. T., ABDELNUR, P. V., FAVARO, L. C. de L.
Other Authors: Caio de Oliveira Gorgulho Silva, Universidade de Brasília; Kelly Barreto Rodrigues, Universidade de Brasília; Amanda Araújo Souza, Universidade de Brasília; Antonielle Vieira Monclaro, Universidade de Brasília; Gisele Soares Anastácio, Universidade de Brasília; THAIS DEMARCHI MENDES, CNPAE; SILVIA BELEM GONCALVES, CNPAE; THAIS FABIANA CHAN SALUM, CNPAE; DASCIANA DE SOUSA RODRIGUES, CNPAE; MONICA CARAMEZ TRICHES DAMASO, CNPAE; PATRICIA VERARDI ABDELNUR, CNPAE; LEIA CECILIA DE LIMA FAVARO, CNPAE.
Format: Anais e Proceedings de eventos biblioteca
Language:Portugues
pt_BR
Published: 2020-12-07
Subjects:Bactérias extremófilas, Fungos filamentosos, Mono-oxigenases líticas de polissacarídeos, Espectrometria, Celulose, Pichia pastoris,
Online Access:http://www.alice.cnptia.embrapa.br/alice/handle/doc/1127758
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